HPLC色譜純?nèi)軇?正戊烷

簡要描述：HPLC級別溶劑具有以下優(yōu)點:
·低紫外線吸收，確保靈敏度;
.可用于熒光檢測;
-嚴(yán)格控制非揮發(fā)性物質(zhì)、游離酸、游離堿和水的含量低;
-嚴(yán)格的梯度測試以檢測干擾峰和基線漂移情況;

產(chǎn)品型號：CAEQ-4-019028-1000
廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家
更新時間：2024-12-24
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化學(xué)試劑

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    HPLC，≥99.9%

    通常來說，HPLC對流動相的基本要求是∶①與固定相不互溶，不發(fā)生化學(xué)反應(yīng);②對樣品有適宜的溶解度，要求k值在1～10范圍內(nèi)（可用范圍)或2～5（最佳范圍），溶解度太大，k值太小，不利于分離;溶解度太小，k值太大，可能使樣品在流動相中產(chǎn)生沉淀;⑧必須與檢測器相適應(yīng)。例如用紫外檢測器，流動相本身在檢測波長處應(yīng)無吸收;④流動相的粘度要小，可以降低色語柱的阻力而提高柱效;⑤純度高，不含機(jī)械雜質(zhì)。

    高效液相色譜流動相的選擇及注意事項如下:

    1、流動相的性質(zhì)要求。一個理想的流動相溶劑應(yīng)具有低粘度、與檢測器兼容性好、易于得到純品和低毒性等特征。選好填料(固定相)后，強溶劑使溶質(zhì)在填料表面的吸附減少，相應(yīng)的容量因子k降低;而蛟弱的溶劑使溶質(zhì)在填料表面吸附增加，相應(yīng)的容量因子k升高。理論塔板數(shù)N一般與流動相的粘度成反比。所以選擇流動相時應(yīng)從以下幾個方面考慮∶@流動相不得改變填料的任何性質(zhì)。低交聯(lián)度的離子交換樹脂和排阻色譜填料有時遇到某些有機(jī)相會溶脹或收縮，從而改變色諾柱填床的性質(zhì)。堿性流動相不能用于硅膠柱系統(tǒng)。酸性流動相不能用于氧化鋁、氧化鎂等吸附劑的柱系統(tǒng)。②純度。色諾柱的壽命與流動相有較大的關(guān)系，特別是其所含雜質(zhì)在柱上有大量沉積的溶劑。③與檢測圈匹配。使用紫外檢測器時，所用流動相在檢測波長下不得有吸收，或吸收很小。④粘度要低。高粘度溶劑會影響溶質(zhì)的擴(kuò)散、傳質(zhì)，降低柱效，還會使柱壓增加，分離時間延長。最好選擇沸點在100C以下的流動相。

    2、流動相的pH值。采用反相色譜法分離弱酸或弱堿樣品時，通過調(diào)節(jié)流動相的pH值，以抑制樣品組分的解離，增加組分在固定相上的保留，并改善峰形的技術(shù)稱為反相離子抑制技術(shù)。對于弱酸，流動相的pH值越小，組分的k值越大，當(dāng)pH值遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于弱酸的pKa值時，弱酸主要以分子形式存在;對弱堿，情況相反。分析弱酸樣品時，通常在流動相中加入少量弱酸，常用50mmol/L磷酸鹽緩沖液和1%酣酸溶液;分析弱堿樣品時，通常在流動相中加入少量弱堿，常用50mmol/L磷酸鹽緩沖液和30mmol/L三乙胺溶液。

    3、流動相的選擇。在化學(xué)鍵合相色譜法中，溶劑的洗脫能力直接與它的極性相關(guān)。在正相色諾中，溶劑的強度隨極性的增強而增加﹔通常采用烷經(jīng)加適量極性調(diào)整劑。反相色譜的流動相通常以水作基礎(chǔ)溶劑，再加入一定量的能與水互溶的極性調(diào)整劑，如甲醇、乙腈等，極性調(diào)整劑的性質(zhì)及其所占比例對溶質(zhì)的保留值和分離選擇性有顯著影響。一般情況下，甲醇-水系統(tǒng)能滿足多數(shù)樣品的分離要求，且粘度小、價格低，是反相色譜常用的流動相.

    4、流動相的就過。所有溶劑使用前都必須經(jīng)0.45um濾膜濾過，以除去雜質(zhì)，色譜純試劑也不例外。用速膜過跳時，特別要注意分清有機(jī)相濾膜和水相濾膜。有機(jī)相濾膜一般用于過濾有機(jī)溶劑，過濾水溶液時流速低或濾不動。水相濾膜只能用于過濾水溶液，嚴(yán)禁用于有機(jī)溶劑，否則濾膜會被溶解。溶有速膜的溶劑不得用于HPLC，對于混合流動相，可在混合前分別越過，如需混合后疏過，選有機(jī)相旎膜。對于冰箱過夜保存的流動相，在使用前仍建議過濾后再使用。

    5、流動相的脫氣，所用流動相必須先脫氣，否則容易產(chǎn)生氣泡，影響泵的正常工作。氣泡還會影響柱的分離效率，影響檢測器的靈敏度、基線穩(wěn)定性，甚至無法檢測。此外，溶解在流動相中的氧還可能與樣品、流動相甚至固定相反應(yīng)。溶解氣體還會引起溶劑pH值的變化，結(jié)果容易產(chǎn)生誤差。溶解氧能與某些溶劑(如甲醇、四氫味喃）形成有紫外吸收的絡(luò)合物，此絡(luò)合物會提高背景吸收，并導(dǎo)致檢測靈敏度的輕微降低，但更重要的是，會在梯度淋洗時造成基線漂移。超聲脫氣比較好，20分鐘的脫氣時間基本上就夠了。

    6、流動相的制備。用高純度的試劑配制流動相，必要時照紫外分光光度法進(jìn)行溶劑檢查，應(yīng)符合要求，水應(yīng)為新鮮制備的高純水，利用超級純水圈制得或用重蒸餾水。凡規(guī)定pH值的流動相應(yīng)使用精密pH計進(jìn)行調(diào)節(jié)。應(yīng)配制足量的流動相備用.

    7、流動相的貯存。流動相一般貯存于玻璃、聚四氟乙烯或不銹鋼容器內(nèi)，不能貯存在塑料容圈中。因許多有機(jī)溶劑如甲醇、乙酸等可浸出塑料表面的增塑劑，導(dǎo)致溶劑受污染。這種被污染的溶劑如用于HPLC系統(tǒng)，可能造成柱效降低。貯存容器一定要蓋嚴(yán)，防止溶劑揮發(fā)引起組成變化，也防止氧和二氧化碳溶入流動相。磷酸鹽．乙酸鹽緩沖液很易長霉，應(yīng)盡量新鮮配制使用。

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